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如何選擇高效液相色譜柱

日期:2024-08-22 20:47
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摘要:如何選擇高效液相色譜柱 1、正相色譜 正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)(ZH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料。 由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性教強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小,即極性強(qiáng)落的組份*先被沖洗出色譜柱。 正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯(Chloroform)二氯甲烷(Methylence Chloride)等. 2、反相色譜 反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對(duì)教弱的官能團(tuán)的鍵合相。 反相色譜...
如何選擇高效液相色譜柱
1、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)(ZH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料。
由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性教強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小,即極性強(qiáng)落的組份*先被沖洗出色譜柱。
正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯(Chloroform)二氯甲烷(Methylence Chloride)等.
2、反相色譜
反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對(duì)教弱的官能團(tuán)的鍵合相。
反相色譜所使用的流動(dòng)相極性教強(qiáng),通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。
樣品流出色譜柱的順序是極性教強(qiáng)組合*先被沖出,而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。
常用的反相填料有C18(ODS) C8(MOS)。C4(B)C6H5(Phenyl)等。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx
3、聚合物填料:
聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等,其主要優(yōu)點(diǎn)是在PG值為1-14均可使用。
相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料,這類填料具有更強(qiáng)的淑水性;大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。
現(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料,色譜柱柱效教低。
4、其他無(wú)機(jī)填料
其它HPLC的無(wú)機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其特殊的性質(zhì),一般**于特殊的用途。如墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷基鍵合相,石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),不再需其它的表面改性,該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng),石墨化碳可用于分離某些幾何導(dǎo)構(gòu)體,又由于HPLC流動(dòng)相中不會(huì)被溶解,這類柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可用于HPLC,氧化鋁微粒剛性強(qiáng),可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,其優(yōu)點(diǎn)是可在PH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng),應(yīng)用范圍受到一定的限制,所以未能廣泛應(yīng)用,新型氧化誥填料也可用于   HPLC,商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化誥微球色譜柱,應(yīng)用PH范圍1~14,溫度可達(dá)到1000C。由于氧化誥填料幾年才開(kāi)始研究,加之前的實(shí)驗(yàn)難度,其重要用途與優(yōu)勢(shì)尚在進(jìn)行中。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx
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